ה ההבדל העיקרי בין ניטרוצלולוזה לקרום ניילון הוא ש לקרום ניטרוצלולוזה יש זיקה גבוהה לקשירת חלבונים ואילו לקרום הניילון יש זיקה גבוהה לקשירת חומצה גרעינית. יתר על כן, אינטראקציות הידרופוביות ואלקטרוסטטיות קושרות מקרומולקולות לממברנות הניטרוצלולוזה ואילו אינטראקציות יוני, הידרופוביות ואלקטרוסטטיות קושרות מקרומולקולות לקרום הניילון.

ניטרוצלולוזה וקרום ניילון הם שני סוגים של ממברנות שאליהן מועברים המקרו -מולקולות מהג'ל. עם זאת, ניתן להשתמש בממברנות ניטרוצלולוזה גם בכדי לקשור DNA ו- RNA.

זיקה, Biodyne A, Biodyne B, Nitrocellulose, חומצות גרעין, ניילון, גודל נקבוביות, חלבונים

מהי ממברנת ניטרוצלולוזה

קרום ניטרוצלולוזה היא מטריצה ​​נפוצה המשמשת בסופג המערבי בשל הזיקה המחייבת את חלבון. עם זאת, ניתן להשתמש בו לאיתור חומצות גרעין מלבד חלבונים וגליקופרוטאינים. אימוביליזציה של המקרומולקולות מתרחשת בעיקר באמצעות אינטראקציות הידרופוביות. קשרי מימן נוצרים גם בין קבוצות הניטרו של הממברנה ושרשראות הצד של חומצת האמינו של החלבונים. אימוביליזציה של חלבונים תהיה גבוהה בריכוז המלח הגבוה והמתנול הנמוך.

איור 1: עקרון הכתם

ממברנות Nitrocellulose זמינות בצורות טהורות של 100% של nitrocellulose בעל שטח פנים גבוה, שהוא אחיד. המידות המוקדמות הזמינות הן 0.2 מיקרומטר ו -0.45 מיקרון. גודל הנקבוביות הקטן טוב יותר לקשירה עם חלבונים קטנים (<14 kDa). יכולת הקישור והשמירה של החלבונים היא 80-250 מיקרוגרם/ס"מ². הממברנות שהורכבו מראש מוכנות לשימוש. אחד היתרונות העיקריים של ממברנות ניטרוצלולוזה הוא הרקע הנמוך מאוד שלה מכיוון שניתן לחסום אותו בקלות. ניתן להפשיט ולדחות את קרומי הניטרוצלולוזה הנתמכים.

מהי ממברנת ניילון

קרום ניילון הוא מטריצה ​​בשימוש נרחב לקשירת חומצות גרעין. ממברנות ניילון חזקות מכאנית מממברנות ניטרוצלולוזה. שני הסוגים העיקריים של קרומי ניילון המשמשים סופג הם Biodyne A ו- Biodyne B. גודל הנקבוביות של שני הסוגים הוא 0.45 מיקרון. הם עמידים בפני חום וממסים. כמו כן, הם לא יתכווצו, ייסדקו או יקרעו. שניהם נותנים רקע נמוך מממברנות ניטרוצלולוזה.

איור 2: ממברנה כתם דרומית

קווי דמיון בין ניטרוצלולוזה לממברנת ניילון

ההבדל בין ניטרוצלולוזה לממברנת ניילון

הַגדָרָה

קרום ניטרוצלולוזה מתייחס לקרום דביק המשמש לשתיקת חומצות גרעין וחלבונים בסופג ואילו קרום ניילון מתייחס לסוג ממברנה בעלת חוזק גבוה ועמידות בחום המשמשת לשתיקת מקרומולקולות.

מורכב מ

ממברנות Nitrocellulose מורכבות מתאית חנקתית בעוד שממברנות ניילון מורכבות מניילון Biodyne A ו- Biodyne B שאינו משתנה או טעון חיובי.

גודל הנקבוביות

גדלי הנקבוביות של ממברנות ניטרוצלולוזה הן 0.2 מיקרון ו -0.45 מיקרומטר ואילו גודל הנקבוביות של ממברנות הניילון הוא 0.45 מיקרון.

כוח

ממברנות Nitrocellulose שבירות ולכן אינן ניתנות לשימוש חוזר בעוד ממברנות ניילון חזקות מבחינה מכנית.

שיטת העברה

העברה אלקטרופורטית משמשת בעיקר בהעברת חלבונים אל ממברנות הניטרוצלולוזה בעוד שהעברת נימים היא הנוהג המקובל עם ממברנות ניילון.

זִיקָה

לממברנות Nitrocellulose יש זיקה גבוהה לחלבון בעוד שלקרומי הניילון יש זיקה גבוהה לחומצות גרעין. ניתן להשתמש בקרומי ניטרוצלולוזה גם לחומצות גרעין.

סופג

ממברנות ניטרוצלולוזה טובות יותר לסופג מערבי ואילו ממברנות ניילון טובות יותר לספוג דרום וצפוני.

אינטראקציות מחייבות

אינטראקציות הידרופוביות ואלקטרוסטטיות קושרות מקרומולקולות לקרום הניטרוצלולוזה ואילו אינטראקציות יונית, הידרופוביות ואלקטרוסטטיות קושרות מקרומולקולות לקרום הניילון.

כושר קישור חלבון

יכולת קישור החלבון של קרום ניטרוצלולוזה היא 80-250 מיקרוגרם/ס"מ² בעוד יכולת הקישור לחלבון של קרום הניילון היא 150-200 מיקרוגרם/ס"מ².

סיכום

קרום ניטרוצלולוזה הוא קרום שביר המשמש בעיקר לשתק חלבון בסופג המערבי ואילו קרום ניילון הוא קרום חזק המשמש בעיקר לשתק חומצות גרעין. ממברנות הניטרוצלולוזה קושרות מולקולות באמצעות אינטראקציות הידרופוביות ואילו ממברנות הניילון נקשרות מולקולות באמצעות אינטראקציות אלקטרוסטטיות. לכן ההבדל העיקרי בין ניטרוצלולוזה לקרום ניילון הוא הזיקה.

התייחסות:

1. "ממברנות ניטרוצלולוזה לסופג מערבי | תרמו פישר סיינטיפיק - LK. ” Thermo Fisher Scientific, Thermo Fisher Scientific, זמין כאן 2. "Biodyne A ממברנת ניילון, 0.45 מ ', 8 ס"מ על 12 ס"מ." Thermo Fisher Scientific, Thermo Fisher Scientific, זמין כאן 3. "ממברנת ניילון Biodyne B, 0.45 מ ', 8 ס"מ על 12 ס"מ." Thermo Fisher Scientific, Thermo Fisher Scientific, זמין כאן

באדיבות התמונה:

1. "ביולוגיה כתומה" מאת Gddivers-עבודה משלה (CC BY-SA 3.0) באמצעות Commons Wikimedia2. "קרום כתם דרומי" מאת Bojan Žunar-יצירה משלו (CC BY-SA 4.0) באמצעות Commons Wikimedia